冰醋酸加入燒瓶中，然后加入硫酸和異戊醇，攪拌下加熱回流，當分餾柱頂端溫度達到132℃時即反應完全。然后進行粗蒸餾，收集分餾柱頂136-143℃的餾分即為粗酯。粗酯用飽和食鹽水洗兩次，用氫氧化鈉、碳酸鈉混合堿液中和酸，再用氯化鈣干燥后，加入精餾裝置進行精餾，收集138-143℃的餾分即為成品。
1.乙酸異戊酯是重要的溶劑，能溶解硝化纖維素、甘油三松香酸酯、乙烯樹脂、香豆酮樹脂、松香、乳香、達馬樹脂、山達樹脂、蓖麻油等。在日本，本品80%用作香料，有較強的果實香味，似梨、香蕉、蘋果等香味。因此廣泛用作各種食用果實香精。在煙用香精、日用化妝香精中也有適量應用。還用于人造絲、染料、人造珍珠、青霉素的提取等方面。
2.用作油脂、橡膠、硝酸纖維素、清漆、鞋油、油墨、防水漆、織物染色處理、藥品萃取精制等的溶劑以及香料制造。
3.用作分析試劑，如作溶劑，萃取劑，色譜分析標準物質。還用作食品添加劑。還用于印染、照相業。
4.是制造噴漆溶劑、稀釋劑的主要成分之一。
儲存注意事項：儲存于陰涼、通風的庫房。遠離火種、熱源。庫溫不宜超過30℃。應與氧化劑、酸類、鹵素分開存放，切忌混儲。采用防爆型照明、通風設施。禁止使用易產生火花的機械設備和工具。儲區應備有泄漏應急處理設備和合適的收容材料。
健康危害：對眼和粘膜有刺激作用，高濃度吸入可引起系統損害，甚至肝腎損害。急性中毒可出現急性結膜炎、咽喉炎、支氣管肺炎、肺水腫。長期接觸，有流淚、咳嗽、喉干、疲勞等癥狀，重者伴有、惡心、嘔吐、胸悶、心悸、食欲不振等。可致皮膚干裂、皮炎或濕疹；可致貧血，嗜酸粒細胞增多，注意在使用的時候通風開窗。
燃爆危險：該品易燃，有毒，具刺激性。