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      生物凍干機(jī)的操作流程

      2023-04-28 15:22   2208次瀏覽
      價 格: ¥ 146000

      制藥凍干機(jī)適用大部分病菌、芽孢桿菌、病毒感染、噬菌體、立克次體、和酵母菌等真空泵冷凍干燥儲藏,但是不適合黃曲霉菌的型、菌類、藻類植物和瘧原蟲等。其操作方法如下所示:

      1、安瓿管提前準(zhǔn)備

      安瓿管原料以中性化夾層玻璃合適。清理安瓿管時,首先用2%硫酸泡浸留宿,飲用水沖干凈后,用純凈水泡浸至pH中性化,干后、貼標(biāo)簽,標(biāo)出來菌號及時長,添加藥棉塞后,121℃下高壓15-20min,預(yù)留。

      2、保護(hù)劑的挑選提前準(zhǔn)備

      保護(hù)劑類型應(yīng)該根據(jù)微生物菌種類型挑選。配置保護(hù)劑時,需要注意其濃度值及pH值,及其方法。如血清蛋白,可以用過濾;牛乳先要脫油,用離心式方式除去頂層植物油脂,一般在100℃間歇性燒開2-3次,每一次10-30min,預(yù)留。

      3、干凍樣品提前準(zhǔn)備

      在zui合適的培養(yǎng)條件下將細(xì)胞培養(yǎng)基至靜止期或成熟,開展純凈度檢查的時候(參照國家科技部當(dāng)然高新科技資源共享平臺協(xié)同管理方法辦公室文件《微生物菌種純度檢測技術(shù)規(guī)程》(實(shí)施)),與保護(hù)劑攪拌均勻,分裝。微生物培養(yǎng)物濃度值以體細(xì)胞或胞子不得少于108-1010個/ml合適(以大腸埃希菌為例子,為了能獲得每毫升1010個體細(xì)胞菌液2mL-2.5mL,僅需10mL瓊脂粉斜坡兩只)。選用比較長的孔狀滴定管,立即滴進(jìn)安瓿管底端,切記不能濺污上端壁厚,每管分裝量約0.1-0.2mL,倘若球型安瓿管,裝量為大半個球部。倘若液體培養(yǎng)的微生物菌種,應(yīng)離心式除去培養(yǎng)液,再將培養(yǎng)物與保護(hù)劑攪拌,再分裝于安瓿管內(nèi)。分裝安瓿管時長要盡量短,在1-2小時之內(nèi)分裝結(jié)束并預(yù)凍。分裝時要注意在無菌檢測環(huán)境下實(shí)際操作。

      4、預(yù)凍

      一般預(yù)凍2個小時以上,溫度做到-20℃到-35℃以內(nèi)。

      5、冷凍干燥

      選用冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥。將冷凍后的試品安瓿管放置冷凍干燥機(jī)設(shè)備烘干箱內(nèi),逐漸冷凍干燥,時長一般為8-20鐘頭。

      停止干燥時間應(yīng)依據(jù)以下情況判斷:

      —— 安瓿管中干凍物呈酥小塊或疏松塊狀

      —— 真空值貼近滿載時的zui低值

      —— 試品溫度與管內(nèi)溫度貼近

      —— 采用1-2支對照料,其水分與菌懸液同量,視作干躁完成

      —— 采用一個安瓿管,裝1-2%氯化鈷,如變深蘭色,可以看作干躁完成

      冷凍干燥完成后,取下試品安瓿管放置烘干機(jī)內(nèi),預(yù)留。

      6、真空封口及真空泵檢測

      將安瓿管頭頸用環(huán)火苗拉細(xì),隨后選用機(jī)械泵真空包裝,在真空泵環(huán)境下將安瓿管頭頸加溫熔封。

      熔封后干燥管可采取高頻率火花放電真空泵檢測儀測量真空值。

      7、儲藏

      安瓿管應(yīng)超低溫遮光儲藏。

      8、質(zhì)量檢測

      冷凍干燥后提取若干支安瓿管開展各項(xiàng)指標(biāo)查驗(yàn),如成活率、生產(chǎn)量、形狀基因變異、霉菌環(huán)境污染等。

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